多花黃精 (Polygonatum cyrtonema Hua) 是一種藥食同源的多年生草本植物，具有治療呼吸道疾病、調(diào)節(jié)免疫功能和增強(qiáng)肝臟健康的悠久傳統(tǒng)。目前研究表明，多糖、皂苷和黃酮是多花黃精的主要活性成分，而生物活性肽作為一類影響藥效的大分子往往遭到忽視。抗氧化肽作為目前研究最為廣泛的生物活性肽，其活性與多花黃精藥效息息相關(guān)卻未見相關(guān)報道。

近日，Food Bioscience在線發(fā)表了新疆農(nóng)業(yè)大學(xué)馬生軍課題組題為“Preparation, separation, and identification of antioxidant peptides from protein hydrolysate of Polygonatum cyrtonema Hua”的研究論文，該研究通過水解多花黃精粗蛋白，分離鑒定得到氨基酸序列為“QFLPF、FVPF以及FPNLF”的三種多花黃精抗氧化肽，并通過HepG2氧化損傷細(xì)胞模型驗(yàn)證其細(xì)胞保護(hù)作用。

研究人員首先基于單因素以及響應(yīng)面法，以抗氧化能力作為響應(yīng)指標(biāo)，對多花黃精粗蛋白酶解方法進(jìn)行優(yōu)化，然后基于抗氧化活性追蹤的原則，通過體外抗氧化實(shí)驗(yàn)結(jié)合超濾膜分離以及Sephadex G-25凝膠柱層析分離得到了抗氧化能力最強(qiáng)的多花黃精粗蛋白水解物組分PcPH-I-F2。隨后使用Nano-LC-Q Exactive Plus quadrupole-orbitrap mass spectrometry對粗蛋白、內(nèi)源性肽以及PcPH-I-F2序列進(jìn)行鑒定，得出F2組分中存在的肽的數(shù)量（11704）顯著高于內(nèi)源性肽（2454）和粗蛋白（2334），證明了抗氧化肽的有效富集、并通過生物信息學(xué)以及分子對接預(yù)測得出抗氧化潛力最高的三個序列分別為QFLPF、FVPF以及FPNLF。最后使用過氧化氫對HepG2細(xì)胞進(jìn)行氧化損傷模型建立，使用三種肽進(jìn)行干預(yù)，驗(yàn)證了其在濃度為100μg/mL時與模型組相比細(xì)胞存活率提高6.39%（QFLPF）、14.51%（FVPF）和9.98%（FPNLF）。

研究結(jié)果表明，多花黃精在抗氧化肽方面展示出顯著潛力。通過質(zhì)譜鑒定和各種體外抗氧化實(shí)驗(yàn)證實(shí)了離線二維分離顯著富集了抗氧化肽。三種抗氧化肽單體具有保護(hù)HepG2細(xì)胞免受氧化損傷的能力。因此，該研究為深入探索多花黃精中的抗氧化肽提供了有價值的信息，并促進(jìn)肽作為食品功能成分的開發(fā)。

圖1抗氧化肽富集效果比對

圖2分子對接結(jié)果

圖3抗氧化肽細(xì)胞氧化損傷保護(hù)作用探究

新疆農(nóng)業(yè)大學(xué)食品科學(xué)與藥學(xué)2022級食品科學(xué)與工程專業(yè)研究生張巖巖與食品科學(xué)與藥學(xué)學(xué)院副教授馬生軍為本文的共同第一作者，湖南醫(yī)藥學(xué)院蔡偉教授為通訊作者。研究相關(guān)工作得到湖南省科技創(chuàng)新計(jì)劃（no.2012022RC1228）以及湖南省社會科學(xué)創(chuàng)新研究基地（民族醫(yī)藥民族文化研究基地）資助支持。